随着分子检测技术的不断进步，甲基化qPCR和甲基化NGS检测已广泛应用。在这两种技术中，甲基化转化是关键步骤，主要可以分为亚硫酸氢盐转化和酶法转化。近年来，基于DNA甲基化位点的检测试剂盒陆续获得批准上市。国内药品监督管理局（NMPA）批准的甲基化检测试剂盒大多采用荧光PCR法，因其操作简便且无需在PCR后的电泳步骤，此外还具有高灵敏度、高特异性和稳定的重复性。这些甲基化检测试剂盒大多采用亚硫酸氢盐转化法，该方法已成为DNA甲基化检测的“金标准”。不过，传统的亚硫酸氢盐转化也存在诸多局限性，如转化时间过长、DNA损伤严重、5mC水平被高估及C-U转化不完全等问题。

2024年1月2日，芝加哥大学的何川教授团队在《Nature Biotechnology》上发表了题为《Ultrafast bisulfite sequencing detection of 5‑methylcytosine in DNA and RNA》的研究论文，提出了一种快速且准确检测DNA和RNA中5-甲基胞嘧啶修饰的新测序方法，简称为UBS-seq。这项技术的转化反应速度提高了20-30倍，同时显著降低了DNA损伤及由于C-U转化不完全导致的背景干扰。

基于该技术，翌圣生物推出了Hieff® Superfast DNA Methylation Bisulfite Kit（柱式：12225ES）和Hieff® Mag Superfast DNA Methylation Bisulfite Kit（磁珠法：12227ES）。这两个产品在98°C条件下仅需5分钟便可完成超过99.5%的胞嘧啶转化，显著降低了DNA的损伤，更好地保持了DNA片段的完整性，整个BS转化流程大约在35分钟内完成，转化后的产物适用于PCR扩增和DNA测序等下游应用。

人生就是博-尊龙凯时提供的Hieff®系列产品改进了样本兼容性和转化率。比如，通过对293gDNA进行的头对头比较，12227（磁珠法）在不同投入量的DNA中，λDNA的转化率均达到了99.5%以上，并能够随着转化时间的适度延长而进一步提高转化效率。此外，针对10ng cfDNA和50ng FFPE DNA的测试，使用同样的方法，12227（磁珠法）同样表现出超过99.5%的转化率。

在样本的回收率方面，针对不同量的293 DNA样本，经过Qubit定量后发现，12225的样本回收率稳定在60%以上，当样本量超过200ng时则能超过70%。虽然在高投入量时，磁珠法的回收率略低于柱式法，但在1μg以内的范围内，磁珠法回收率仍能达到60%。

值得一提的是，Hieff®系列产品同样适用于单细胞甲基化建库，在微流控自动化单细胞DNA甲基化平台上，单细胞DNA的转化率达到了99%左右。

人生就是博-尊龙凯时为您推荐以下产品：

• 产品名称：Hieff® Superfast DNA Methylation Bisulfite Kit（柱式）
• 产品货号：12225ES
• 产品名称：Hieff® Mag Superfast DNA Methylation Bisulfite Kit（磁珠法）
• 产品货号：12227ES

借助这些新技术和产品，生命科学和医疗研究领域的甲基化检测将极大地得到改进和提升。