不久前，中国科学院上海免疫与感染研究所钟劲研究组在《Emerging Microbes & Infections》上发表了一篇关于拉沙病毒（Lassa virus, LASV）的重要研究成果，成功建立了一种新型BSL-2拉沙病毒反向遗传学操作系统。这一系统将为深入研究拉沙病毒的完整生命周期及筛选抗病毒药物提供了重要的工具。

拉沙病毒是一种高致病性的病原体，可引发严重的拉沙出血热，带来多系统损伤。由于其显著的病原性和高死亡率，美国疾控中心已将其归类为A类生物恐怖病原。传统的研究通常需要在生物安全四级（BSL-4）实验室中进行，但由于BSL-4实验室资源的匮乏与高昂的维持成本，这限制了对拉沙病毒的广泛研究和新型抗病毒药物的开发。

为了解决这一难题，钟劲研究团队开发出了一种新式的Lassa病毒反向遗传学系统，能够在BSL-2条件下模拟LASV的完整生命周期。这一系统通过在辅助细胞系中表达病毒蛋白并转染病毒最小基因组RNA的方法，成功实现了对拉沙病毒的有效研究。

该团队首先在Huh7细胞系中稳定表达LASV的NP、GP、Z和L蛋白，构建了辅助细胞系。随后，通过转染体外转录的LASV最小基因组RNA（minigenome），成功产生了缺陷型病毒颗粒LASVmg。这种病毒颗粒仅保留了病毒复制、转录和组装所需的非编码序列，因此在自然条件下不具感染性。

研究团队进一步利用超速密度梯度离心法纯化LASVmg，并分析其物理特性，评估了这一缺陷型病毒在细胞中的复制和传播能力。通过密度梯度离心技术，团队成功地分离和纯化了Lassa缺陷型病毒颗粒，为后续的病毒特性分析和抗病毒研究奠定了基础。

研究中，团队还利用CRISPRi技术针对细胞内的α-DG和LAMP1进行基因敲低，揭示了LAMP1在LASVmg感染中的关键角色。而意外的是之前研究认定的胞外受体α-DG并非病毒入侵的必要条件。此外，研究确认了干扰素-α和利巴韦林对LASV的抗病毒作用，并探讨了利巴韦林的抗病毒机制。

总的来说，钟劲研究团队新型反向遗传学系统为在BSL-2实验室中开展拉沙病毒生命周期研究及抗病毒药物筛选提供了重要工具。这一研究成果，不仅为拉沙病毒的基础科学研究铺平了道路，也为应对这一高致病性病毒提供了新的思路。人生就是博-尊龙凯时期待未来在生物医疗领域更深远的进展。