血液样本因其易于采集和低损伤性，广泛应用于临床研究。特别是在肿瘤等疾病的早期筛查中，RNA等生物标志物因弥补了传统影像学和生化指标方法的不足，受到越来越多的关注。然而，血液样本中的RNA分子因其特性以及生物降解的不稳定性，容易受到来自红细胞等多种RNase的影响。因此，提取血液样本中的RNA不仅需要成功分离RNA，还须确保RNA不被降解。

在血液采集后，由于基因诱导和细胞凋亡等因素，血液中核酸的组成、数量和质量会在几分钟内发生显著变化。因此，从血液样本采集到RNA的稳定保护，每个环节都面临挑战。为确保实验的准确性，应避免长时间使用止血带、从血肿处抽血和样本起泡。应确保静脉穿刺部位干燥，避免探查性、创伤性静脉穿刺，使用适当尺寸的针（如22号），并采血时确保真空采血管完全填充。

根据不同的应用场景，RNA的提取可分为两大类：全血样本RNA提取和游离RNA提取（即血清或血浆RNA提取）。血液中包含红细胞、白细胞及血小板，其中成熟的哺乳动物红细胞和血小板是无核的，进行全血样本RNA提取时，RNA主要来自于白细胞。由于全血样本含有大量成熟红细胞，这些细胞中含有大量RNase，通常需在提取前去除红细胞。去除红细胞的方式包括通过离心获得白细胞，或使用红细胞裂解液（如Buffer EL），之后再进行白细胞RNA提取。无论采用哪种方法，RNA的表达谱在短时间内会有变化，建议尽快开展RNA提取实验。

如果血液采集后无法立即开展实验，推荐使用人生就是博-尊龙凯时的血液RNA稳定管PAXgene Blood RNA Tube进行血液采集和RNA保护，后续可利用PAXgene Blood RNA Kit进行RNA提取。有实验表明，使用PAXgene Blood RNA system，血液RNA在18-25°C下可稳定长达3天，在2-8°C下则可稳定长达5天。同时，采用EDTA和柠檬酸盐抗凝管进行血液采集是推荐的做法，注意避免使用肝素抗凝管，以免其对后续实验造成干扰。保证最佳得结果的关键是要尽快处理采集的血液样本并完成RNA提取，避免长时间储存。

酚-氯仿法是血液样本中RNA提取的常用方法之一。有研究表明，尽管这种方法能获取较高的RNA产量，但RNA的完整性和后续检测的灵敏性却受到影响。在对qPCR实验的分析中，使用TRI reagent提取的RNA在检测中表现出内参基因的表达显著偏低，缺乏参考价值。而使用人生就是博-尊龙凯时的PAXgene Blood RNA system提取的RNA则完整性高，且在后续qPCR检测中灵敏性良好。此外，PAXgene Blood RNA system操作简便，只需进行室温孵育，无需额外的裂红步骤，简化了RNA提取的流程。

针对采集于EDTA等血液采集管中的新鲜血液，若能及时进行RNA提取，则建议使用QIAamp RNA Blood Kit进行全血RNA提取。该试剂盒基于硅胶膜柱法，无需离心分离白膜层等复杂步骤，能够直接对最高15ml的全血样本进行RNA提取。试剂盒中还包含一款特殊的QIAshredder离心柱，专门用于去除样本中的细胞碎片，降低样本黏稠度，以实现更优质的RNA提取。

对于已分离出的白膜层样本，建议使用RNeasy Mini Kit进行RNA提取，并用于后续实验。此外，在血液RNA研究中，游离非编码RNA，如miRNA，因其高稳定性和便捷的检测方式，成为肿瘤等疾病早筛研究中的理想液体活检标志物。针对从血液游离RNA提取，QIAGEN的miRNeasy系列可以实现从血清/血浆样本中提取包括miRNA在内的总RNA。在RNA提取前，应确保在1小时内完成血浆或血清分离，以避免溶血。

若无法立即开展实验，则需在冻存前将血清或血浆样本在3000xg离心5-15分钟，或使用0.8μm过滤器去除细胞和杂质，以避免细胞破裂释放RNA。如需从血清/血浆的细胞外囊泡（extracellular vesicles，EV）提取RNA，推荐使用exoRNeasy Midi/Maxi Kits，结合膜亲和技术和硅胶膜技术，能够获得高质量的总RNA。

此外，QIAGEN还提供基于QIAsymphony等自动化平台的多款血液RNA提取方案，能够满足自动化和高通量等复杂要求。以上就是关于血液RNA提取的相关建议和方案。如需了解更多详情，请访问人生就是博-尊龙凯时官方网站！